Mae cyffuriau Oligonucleotide wedi'u datblygu am fwy na 40 mlynedd ers i'r un cyntaf gael ei eni ym 1978. Fodd bynnag, mae eu datblygiad wedi bod yn arafach na mathau eraill o gyffuriau oherwydd eu hansefydlogrwydd cynhenid a'u heffeithlonrwydd defnydd cellog isel. Mae ymddangosiad systemau cyflwyno newydd a thechnegau addasu cemegol wedi gwella'r problemau hyn yn fawr, ac mae cyffuriau oligonucleotide wedi dangos datblygiad cyflym yn ystod y blynyddoedd diwethaf. Ar hyn o bryd, mae canllawiau a phapurau gwyn y diwydiant eisoes ar werthusiad imiwnogenigrwydd cyffuriau gwrthgyrff a biolegau eraill, ond prin yw'r adroddiadau o hyd ar imiwnogenigrwydd cyffuriau oligonucleotide mewn anifeiliaid neu gleifion, ac nid oes unrhyw ganllawiau systematig. Mae'r ddealltwriaeth gyfyngedig o imiwnogenigrwydd cyffuriau oligonucleotid hefyd yn cyfyngu'n fawr ar ddatblygiad y dosbarth hwn o gyffuriau.
Yr allwedd i imiwnogenedd cyffuriau yw ystyried a all y system imiwnedd adnabod y cyffur fel ei hun a'i oddef, ac mae agweddau eraill sy'n effeithio ar imiwnogenedd yn cynnwys y llwybr gweinyddu a'r clefyd penodol sy'n cael ei drin (Ffigur 1).
Ffigur 1 Ffyrdd o effeithio ar imiwnogenedd (Blaen. Immunol., 18 Awst 2020 Sec. Brechlynnau a Therapiwteg Moleciwlaidd)
Nodweddion cyffuriau: O'u cymharu â'r rhan fwyaf o fiolegau nodweddiadol (fel gwrthgyrff monoclonaidd), mae cyffuriau oligonucleotid yn gymharol fach, yn cynnwys llai o epitopau posibl na chymheiriaid protein mwy, felly ystyrir yn gyffredinol bod ganddynt imiwnogenedd isel. Fodd bynnag, mae'r rhyngweithio rhwng moleciwlau oligonucleotid a'r system imiwnedd yn gymhleth, gyda'r potensial i achosi imiwnedd cynhenid. Mae astudiaethau blaenorol wedi dangos y gall dilyniannau siRNA effeithio ar symbyliad imiwn trwy dderbynyddion tebyg i dollau (TLRs), ac mae dilyniannau siRNA sy'n llawn basau gwanin ac uracil yn dueddol o ysgogi mwy o weithgaredd symbylol imiwn. Er mwyn gwella sefydlogrwydd, diogelwch, defnydd cellog ac effeithiolrwydd cyffuriau oligonucleotide, mae addasiadau cemegol fel arfer yn cael eu cymhwyso iddynt yn y broses o ddatblygu cyffuriau oligonucleotide cenhedlaeth newydd. Mae addasiadau asgwrn cefn asid niwclëig, rhan glycosyl y ribose a'r nucleobase wedi'u defnyddio'n helaeth, ac mae'r addasiadau hyn yn debygol o gynyddu ymatebion imiwn. Yn ogystal, efallai y bydd gan ddilyniannau asid niwclëig tebyg i ficro-organebau hefyd botensial symbylol imiwn, felly efallai y bydd gan ddilyniannau oligonucleotid newydd imiwnogenedd uwch.
Llwybr gweinyddu: Gall cyffuriau Oligonucleotide weithredu trwy wahanol lwybrau gweinyddu, megis pigiadau mewnwythiennol a meinwe, pigiadau llafar ac isgroenol (Ffigur 2).
Ffigur 2 Llwybrau cyffuriau Oligonucleotide o ddulliau gweinyddu a darparu (Nat. Nanotechnol. 16, 630-643 (2021).)
Ar hyn o bryd, mae cyffuriau oligonucleotid cymeradwy yn gweithredu'n bennaf trwy ddanfon i safleoedd cyfyngedig imiwn, ond mae darparu cyffuriau oligonucleotid yn effeithiol i feinweoedd amrywiol yn dal i fod yn her fawr i ddatblygiad cyffuriau oligonucleotid oherwydd yr anhawster i oligonucleotidau basio trwy bilenni. Mae datblygiad cludwyr danfon wedi datrys y broblem hon yn fawr, a gall cludwyr danfon ddod ag ymatebion imiwn sy'n amrywio yn ôl dau orchymyn maint a gallant weithredu trwy amrywiol fecanweithiau. Mae gwahanol gludwyr dosbarthu yn cyflwyno moleciwlau siRNA ar draws cellbilenni mewn ffyrdd unigryw (Ffigur 2), gan ddatgelu siRNA i wahanol symiau a mathau o dderbynyddion adnabod patrwm (PRRs), gan eu gwneud yn fwy agored i adnabyddiaeth imiwnedd gynhenid. Yn ogystal, mae'r dulliau dosbarthu cyffredin presennol o gludwyr conjugation GalNAc (N- asetylated galactosamine) a nanoronynnau lipid (LNP) yn bennaf yn chwistrelliadau mewnwythiennol ac isgroenol, sydd â risg uwch o imiwnogenedd. Yn ystod y blynyddoedd diwethaf, mae dulliau cyflenwi cyffuriau oligonucleotid newydd megis fesiglau mewndarddol, asidau niwclëig sfferig, a chymwysiadau nanotechnoleg hefyd yn dod yn eu blaenau, a fydd hefyd yn dod â heriau newydd i brofion imiwnogenedd.
Strategaeth Ddadansoddi ar gyfer Imiwnogenigrwydd Cyffuriau Oligonucleotid
O ystyried bod imiwnogenigrwydd yn gysylltiedig iawn ag effeithiolrwydd a diogelwch cyffuriau, mae angen dadansoddiad imiwnogenigrwydd ar gyfer cyffuriau oligonucleotid i gefnogi eu datblygiad a threialon clinigol. Mae llawer o egwyddorion bio-ddadansoddol a gymhwysir at gyffuriau protein hefyd yn berthnasol i gyffuriau oligonucleotid, yn bennaf yn dilyn strategaeth dadansoddi imiwnogenigrwydd hierarchaidd, ond mae angen inni hefyd ystyried cydrannau strwythurol unigryw cyffuriau oligonucleotid, llwybrau gweinyddu a safleoedd gweithredu sy'n cynyddu cymhlethdod ymatebion imiwn a dulliau bioddadansoddol.
Yn seiliedig ar nodweddion cyffuriau oligonucleotide, dylid talu rhywfaint o sylw wrth brofi eu imiwnogenigrwydd: 1)Gwrthgyrff gwrthgyffuriau (ADAs)y gellir eu cynhyrchu gan gydrannau addasu cyffuriau, mae angen gwerthuso'n llawn sylweddau dosbarthu a chyfryngau cyflenwi; 2) Mae gan gyffuriau Oligonucleotide amrywiaeth o lwybrau gweinyddu, mae angen inni roi sylw i ganfod gwahanol fathau o wrthgyrff imiwnoglobwlin mewn gwahanol fathau o samplau; 3) Yn ôl y wybodaeth gyfredol, o'i gymharu â chyffuriau traddodiadol, mae ymateb ADA a achosir gan gyffuriau oligonucleotide weithiau'n datblygu'n araf, o bosibl am sawl mis. Felly, wrth gynnal asesiad risg imiwnogenigrwydd yng nghyfnod cynnar ei ddatblygiad, argymhellir achub y samplau ar hyn o bryd ac ymchwilio i'w imiwnogenedd yn seiliedig ar y data newydd a ddatgelwyd yn y clinig, gan ddarparu gwybodaeth ar gyfer astudiaethau diweddarach ac allweddol.
Er mwyn cefnogi datblygiad a threialon clinigol cyffuriau siRNA, mae Pharmaron wedi datblygu dull canfod ar gyfer ADAs a gynhyrchir gan siRNA, ac mae ganddo rai ystyriaethau ac awgrymiadau yn y broses o sefydlu dull:
Oherwydd y strwythur gwahanol i wrthgyrff protein, nid yw'r dulliau labelu protein confensiynol yn berthnasol i labelu cyffuriau siRNA, ac mae dull labelu newydd sy'n cyfuno biotin a digoxin wedi'i gymhwyso'n llwyddiannus;
Oherwydd imiwnogenigrwydd gwan siRNA, mae affinedd y gwrthgorff rheoli positif a baratowyd yn wael. Trwy optimeiddio'r camau canfod yn barhaus, mae sensitifrwydd y dull wedi bodloni'r gofynion rheoleiddio cyfredol.
