Ar hyn o bryd, mae nifer o ddulliau ymchwil in vitro ac in vivo anghlinigol, yn ogystal â phrofiad o ddatblygu cyffuriau wedi'u marchnata. Fodd bynnag, mae rhagfynegi effeithiolrwydd a diogelwch clinigol trwy astudiaethau anghlinigol optimaidd yn parhau i fod yn heriol, ac mae'r erthygl hon yn cynnal dadansoddiad manwl o'r mater hwn.
Dylai fod gan yr ADCs delfrydol o leiaf y tair nodwedd ganlynol:
1. Targedu gallu rhwymo: Dim ond ar wyneb tiwmorau ac ar lefelau uchel y mynegir yr antigen targed ADC delfrydol, heb ei daflu'n hawdd.
2. Proses drawsnewid: Cyn cyrraedd y celloedd targed, yn ddelfrydol ni ddylai'r moleciwl sytotocsig ollwng o'r ADC, sy'n golygu bod yr ADC cyfan wedi'i fewnoli i'r celloedd.
3. Rhyddhau'r moleciwl bach tocsin: Dylai'r moleciwl bach gael ei ryddhau'n gyflym ac yn aruthrol o fewn y celloedd tiwmor; dylai'r moleciwl bach feddu ar wenwyndra uchel i ladd celloedd tiwmor yn effeithlon.
Strategaeth Werthuso Ffarmacoleg ar gyfer ADCs
Fel arfer cynhelir ymchwil gweithredu ffarmacolegol yn ystod y cyfnod darganfod cyffuriau neu werthuso cyn-glinigol. Mae'r prif brosiectau arbrofol y mae angen eu cyflawni yn cynnwys gweithgarwch rhwymo targed, mewnoli trwy gyfryngu gwrthgyrff, ataliad tiwmor in vivo ac in vitro (ar gyfer ADCs gwrth-diwmor), sytowenwyndra cellog dibynnol gwrthgorff (ADCC), ac ategu -sytowenwyndra dibynnol (CDC).
Wrth archwilio ffarmacodynameg ADC mewn anifeiliaid, yr ystyriaeth gyntaf yw gwahaniaethau rhywogaethau. Os nad oes gan ADCs weithgarwch rhwymo neu os oes ganddynt weithgarwch rhwymo isel ag antigenau mewn llygod, mae angen ystyried defnyddio anifeiliaid trawsgenig ar gyfer arbrofion ffarmacodynamig, neu gynnal astudiaethau ffarmacodynamig in vivo gyda-gwrthgyrff sy'n deillio o anifeiliaid. Gall anifeiliaid trawsgenig osgoi'r defnydd o wrthgyrff amgen, a phan fynegir yr antigen targed mewn pibellau gwaed neu stroma y gwesteiwr, gall anifeiliaid trawsgenig nid yn unig werthuso'r effeithiau ffarmacodynamig ond hefyd arsylwi adweithiau gwenwyndra i ryw raddau. Os yw'r antigen targed yn cael ei fynegi yn unig mewn celloedd tiwmor dynol, nid oes angen anifeiliaid trawsgenig; gellir archwilio'r effeithiau ffarmacodynamig mewn modelau llygoden noethlymun sydd wedi'u mewnblannu â chelloedd tiwmor dynol. Wrth gynnal astudiaethau ffarmacodynamig ar lefel cellog neu fodel anifeiliaid, gall cynnal astudiaethau PK/PD ar yr un pryd, dadansoddi dosbarthiad targedu cyffuriau, cyfradd deiliadaeth derbynyddion, a'r berthynas rhwng amlygiad ac effaith cyffuriau helpu i ddylunio cyfundrefnau dosio clinigol a dadansoddi canlyniadau astudiaethau diogelwch.
Strategaeth Werthuso Gwenwynegol ar gyfer ADCs
Dethol rhywogaethau anifeiliaid: Mae datgelu nodweddion gwenwyndra ADCs yn llawn mewn astudiaethau diogelwch anghlinigol i gefnogi datblygiad clinigol ADCs, gan asesu perthnasedd rhywogaethau prawf anifeiliaid a thrawsnewidadwyedd canlyniadau astudiaethau anghlinigol yn hanfodol. Mae'r penderfyniad hwn fel arfer yn golygu gwirio affinedd rhwymol ADCs i dargedu antigenau mewn-rhywogaethau anghlinigol o gymharu â bodau dynol, yn ogystal â chymharu'r sbectrwm staenio imiwn-histocemegol mewn astudiaethau adweithedd croes meinwe. Gall swyddogaethau effeithydd neu imiwnogenigrwydd gwrthgyrff amrywio hefyd oherwydd gwahaniaethau rhywogaethau.
Paramedrau datguddiad a metaboledd: Yn ogystal, fel cyffuriau a chynhyrchion biolegol eraill, dylai allosod canlyniadau astudiaethau anghlinigol i bobl gynnwys cymhariaeth o baramedrau datguddiad a metaboledd. Er enghraifft, mae BR-96 yn ADC a ffurfiwyd trwy gysylltu doxorubicin (DOX) yn cofalent â gweddillion cystein o wrthgorff monoclonaidd BR96 dynoledig trwy gysylltydd hydrazide asid maleimidohecsanoic 6{{{.. Mae astudiaethau tocsicoleg wedi dangos, yn wahanol i lygod mawr a mwncïod, bod cŵn yn fwy sensitif i effeithiau gwenwynig BR-96, gyda enteritis hemorrhagic fel y gwenwyndra sy'n cyfyngu ar ddosau. Yn syndod, mae gan BR96-DOX a'r gwrthgorff monoclonaidd heb ei addasu BR96 yr un gwenwyndra sy'n cyfyngu ar ddosau, sy'n dangos bod y gwenwyndra'n cael ei gynhyrchu gan y gwrthgorff monoclonaidd. Yn wahanol i DOX heb ei addasu, ni wnaeth ADCs ysgogi cardiomyopathi mewn modelau llygod mawr. Felly, roedd y dewis dos ar gyfer treial clinigol Cam I o BR96-Dox mewn pynciau dynol yn seiliedig ar y canlyniadau tocsicoleg mewn cŵn.
Mynegiant targed gwrthgyrff: Fel gwrthgyrff monoclonaidd therapiwtig, gall diffyg targedau antigen mewn rhywogaethau prawf anifeiliaid rwystro gwerthusiad anghlinigol o ADCs. Mae canllawiau ICH S6 (R1) ar werthusiad diogelwch rhag-glinigol o fferyllol sy'n deillio o fiotechnoleg (2011) yn nodi, "Dylai'r dewis o rywogaethau ar gyfer cyfuniadau gwrthgyrff sy'n cynnwys tocsinau/tocsinau sy'n cynnwys tocsinau/tocsinau newydd ddilyn yr un egwyddorion cyffredinol ag ar gyfer yr gwrthgyrff heb eu haddasu, sef y rhywogaethau anifeiliaid a'r gwrthgyrff cyflym hynny sy'n ofynnol ar gyfer profi'r gwrthgyrff cyflym monoclop ac anifeiliaid hynny. sbectrwm adweithedd traws sy'n debyg i feinweoedd dynol. Felly, gall penodoldeb rhywogaethau a chlefydau bennu neu gyfyngu ar werthusiad anghlinigol."
Mae mynegiant meinwe arferol yr antigen targed yn bryder diogelwch mawr ar gyfer therapi ADC. Yn ddelfrydol, dylai'r antigen targed gael ei fynegi ar lefelau isel iawn ar gelloedd normal; fodd bynnag, fel y crybwyllwyd yn y ddwy enghraifft uchod, nid yw gwrthgyrff bob amser yn benodol mewn ymarfer. Mae enghreifftiau eraill o wenwyndra posibl sy'n ymwneud â diffyg penodoldeb ar gyfer targedau ADC yn cynnwys NaPi2b, cludwr ffosffad dibynnol ar sodiwm, a fynegir mewn sawl math o diwmor ond sydd hefyd yn amlwg mewn meinweoedd arferol, lle mae'n chwarae rhan mewn homeostasis ffosffad anorganig. Datblygwyd ADC (gwrth-NaPi2b-vc-MMAE) trwy gyfuno gwrthgorff monoclonaidd IgG1 wedi'i ddyneiddio i MMAE trwy gysylltydd peptid vc, a chadarnhawyd bod ganddo affinedd rhwymol penodol mewn meinweoedd dynol arferol a mwnci cranc. Fodd bynnag, er gwaethaf mynegiant lefel uchel yn ysgyfaint arferol mwncïod, gall diogelwch y croesadweithiol hwn fod yn dderbyniol, gyda dos yn cyfyngu ar wenwyndra nad yw'n gysylltiedig â mynegiant meinwe normal. Mae'r effeithiau gwenwynegol mewn llygod mawr arferol, rhywogaethau nad ydynt yn rhwymo, a mwncïod yn gyson â ffarmacoleg MMAE.
Egwyddorion dylunio gwenwyneg cyffredinol: Yn gyffredinol, nid oes angen gosod grwpiau ar wahân ar gyfer y tocsin gwrthgorff monoclonaidd/gwrthgorff noeth, linker/Linker, gan fod y moleciwl gwrthgorff monoclonaidd yn un o'r prif ffactorau sy'n effeithio ar neu'n pennu datguddiad systemig. Dylai dyluniad dos ystyried dos ffarmacodynameg ADCs, nodweddion y moleciwl gwrthgorff, a nodweddion gwenwyndra'r tocsin moleciwl bach.
Canolbwyntiwch ar wenwyndra sy'n gysylltiedig â Llwyth Tâl:Er bod rhyddhau wedi'i dargedu o gyfansoddion moleciwl bach yn cyflawni cyfoethogi cyffuriau mewn meinweoedd targed, gan wella'r ffenestr therapiwtig, mae prif nodweddion gwenwyndra ADCs yn dal i fod yn debyg i rai'r cyfansoddion moleciwl bach cysylltiedig. Mae'r rhan fwyaf o adweithiau gwenwyndra ADC yn llai difrifol na rhoi cyfansoddion moleciwl bach yn uniongyrchol, ond gall rhai ADCs gynyddu adweithiau gwenwyndra meinwe sy'n gysylltiedig â rhwymo targed gwrthgyrff neu rwymo targed oddi ar-. Er bod ADCs yn cynyddu rhyddhau wedi'i dargedu o gyfansoddion moleciwl bach, mae rhai cyfansoddion moleciwl bach yn dal i gael eu rhyddhau'n gynamserol, a gall rhai cyfansoddion moleciwl bach am ddim wasgaru neu drosglwyddo'n gyflym i feinweoedd cyfagos a chylchrediad systemig o gelloedd targed, neu apoptosis a gall difrod celloedd targed arwain at gyfansoddion moleciwl bach am ddim yn mynd i mewn i gylchrediad systemig. Gall rhan gwrthgorff ADCs hefyd rwymo i dderbynyddion neu epitopau arwyneb celloedd organ meinwe nad ydynt yn darged, megis ffagocytosis cellog cyfryngol derbynnydd Fc, a gall y cyffur gael effeithiau gwenwynig ar gelloedd meinwe cyfatebol ar ôl dadansoddiad metabolig. Felly, mae gwenwyndra ADCs yn gysylltiedig yn agos â nodweddion y gwrthgorff, cyfansoddion moleciwl bach, a chysylltwyr, a bydd newidiadau yn nodweddion gwenwyndra ADCs yn digwydd gydag amrywiad y gwrthgorff, cyfansoddion moleciwl bach, a chysylltwyr. Mewn astudiaethau diogelwch anghlinigol, dylid rhoi sylw i effaith strwythur cyfansoddiad cyffuriau a nodweddion ffarmacocinetig ar wenwyndra, a dylid dadansoddi canlyniadau'r arbrofion yn gynhwysfawr.
Genowenwyndra:Yn gyffredinol, nid yw macromoleciwlau biolegol yn rhyngweithio'n uniongyrchol â DNA, ac fel arfer nid oes angen i'r ADC a'i ran gwrthgorff gael profion genowenwyndra. Daw genowenwyndra posibl ADC o'r cyfansoddion moleciwl bach. Os yw cyfansawdd moleciwl bach y llwyth tâl yn gyfansoddyn newydd, dylid cynnal profion genowenwyndra; ar gyfer cyfansoddion moleciwl bach rhad ac am ddim newydd a/neu gysylltwyr newydd a gynhyrchir yn y corff, dylid gwerthuso'r deunyddiau prawf targed yn seiliedig ar briodweddau ffisiocemegol, nodweddion holltiad, a strwythur cynhyrchion holltiad ADCs; os yw data digonol yn dangos bod gan y deunydd prawf targed genowenwyndra, nid oes angen astudiaethau genowenwyndra.
Gwenwyndra atgenhedlu:Gall y cyfansoddion moleciwl bach, y cysylltwyr, a'r gwrthgyrff noeth mewn ADCs gael effeithiau andwyol ar organau atgenhedlu, ffrwythlondeb, datblygiad embryo'r ffetws, a datblygiad epil, felly dylid rhoi sylw i risg gwenwyndra atgenhedlu ADCs. Dylai'r strategaeth ymchwil, dylunio arbrofol, gweithredu, a gwerthuso gwenwyndra atgenhedlu ADC gyfeirio at ganllawiau ICH S5, a chyfuno'r mecanwaith gweithredu a phoblogaeth darged ADCs i fabwysiadu strategaeth ddadansoddi problem benodol -. Gall ADCs a fwriedir ar gyfer cleifion tiwmor cam hwyr gyfeirio at ganllawiau ICH S9 ar gyfer ymchwil i wenwyndra atgenhedlu.
Ar gyfer cynhyrchion biolegol, mae gwenwyndra atgenhedlu fel arfer yn cael ei werthuso mewn rhywogaethau anifeiliaid sy'n berthnasol yn ffarmacolegol. Os yw cnofilod a chwningod yn rhywogaethau anifeiliaid sy'n gysylltiedig â'r targed, dylid defnyddio dwy rywogaeth o anifeiliaid i gynnal profion gwenwyndra datblygiad y ffetws embryo, oni bai bod marwoldeb embryonig neu teratogenedd wedi'i gadarnhau mewn un rhywogaeth. Os yw'r rhywogaethau anifeiliaid targed sy'n rhwymo yn primatiaid nad ydynt yn ddynol neu os nad oes unrhyw rywogaethau anifeiliaid perthnasol, mae llygod mawr neu gwningod yn cael eu hystyried yn gyntaf ar gyfer profion gwenwyndra atgenhedlu i ymchwilio i wenwyndra atgenhedlol cyfansoddion moleciwl bach rhydd. Os yw canlyniadau'r astudiaeth yn cadarnhau positifrwydd, nid oes angen ymchwilio i wenwyndra atgenhedlol gan ddefnyddio rhywogaethau anifeiliaid targed sy'n rhwymo; fel arall, dylid ystyried primatiaid nad ydynt yn ddynol neu anifeiliaid trawsgenig neu foleciwlau amgen ar gyfer profi i ganfod gwenwyndra atgenhedlu cyfryngol gan antigen. Os oes gan y gwrthgorff neu gyfansoddyn moleciwl bach mewn ADCs ddata llenyddiaeth sy'n dangos yn glir risgiau gwenwyndra atgenhedlu posibl, nid oes angen astudiaethau gwenwyndra atgenhedlu a gellir seilio rheolaeth risg berthnasol ar wybodaeth llenyddiaeth.
Carsinogenigrwydd:Yn seiliedig ar nodweddion ADCs, gellir ystyried yr angen am astudiaethau carcinogenigrwydd yn unol â chanllawiau ICH S1, ICH S6, ICH S9, a chanllawiau cysylltiedig eraill.
Imiwnogenigrwydd/Imiwnwenwynig:Gall ADCs achosi imiwnogenedd ar ôl mynd i mewn i'r corff, gan gynhyrchu gwrthgyrff gwrthgyffuriau. Mae gwerthuso imiwnogenigrwydd ADCs yn helpu i ddadansoddi canlyniadau ffarmacocineteg, effeithiolrwydd a diogelwch y cyffur, felly mae canfod gwrthgyrff gwrthgyffuriau fel arfer yn cael eu cyd-fynd ag astudiaethau diogelwch anghlinigol o ADCs. Gellir cynhyrchu gwrthgyrff gwrth-gyffuriau o'r rhan gwrthgorff a'r rhan gyswllt o ADCs, a dylai a oes angen archwiliad pellach o epitopau antigen fod yn seiliedig ar y risg o imiwnogenedd. Dylai'r strategaeth datblygu, dilysu a chanfod dadansoddol ar gyfer dadansoddi imiwnogenedd o ADCs ddilyn y "Canllawiau Technegol ar gyfer Ymchwil Imiwnogenigrwydd Cyffuriau". Gall ADCs gyfeirio at ICH S6, ICH S8, ICH S9, a chanllawiau eraill, a dylunio dangosyddion canfod imiwnowenwyndra yn rhesymol yn seiliedig ar ffactorau megis math a mecanwaith gweithredu ADCs. Yn ogystal ag astudiaethau imiwnowenwyndra arferol, dylid ystyried astudiaethau imiwnowenwyndra ychwanegol os oes angen.
Diogelwch optegol:Cyn treialon clinigol Cam I, dylid gwerthuso'r ffotowenwyndra posibl yn rhagarweiniol yn seiliedig ar briodweddau ffotocemegol a chategorïau ffarmacolegol/cemegol y cyfansoddion moleciwl bach (gan gynnwys cysylltwyr). Os yw'r data hyn yn awgrymu risgiau posibl, dylid cymryd mesurau amddiffynnol priodol ar gyfer y rhai sy'n destun treialon clinigol. Os na all data anghlinigol neu brofiad clinigol werthuso'r risg o ddiogelwch lluniau yn llawn, dylid darparu asesiad diogelwch llun yn unol â'r egwyddorion a ddisgrifir yn ICH S10 cyn treialon clinigol sampl mawr (Cam III).
Adweithedd traws meinwe:Mae astudiaethau croes-adweithedd meinwe yn brofion rhwymo meinwe in vitro a gynhelir gan ddefnyddio technegau imiwn-histocemegol i bennu nodweddion rhwymol gwrthgyrff ac epitopau antigen mewn meinweoedd. Gall astudiaethau adweithedd traws meinwe ddarparu gwybodaeth atodol ddefnyddiol ar gyfer deall dosbarthiad targed a gallant hefyd ddarparu gwybodaeth am rwymo annisgwyl posibl. Mae astudiaethau adweithedd croes meinwe gan ddefnyddio meinweoedd dynol yn rhan annatod o'r gyfres gwerthuso diogelwch dosio clinigol gychwynnol ar gyfer cyffuriau gwrthgyrff. Pan nad oes unrhyw darged-rhwymo rhywogaethau anifeiliaid cysylltiedig, mae gwybodaeth croes-adweithedd meinwe yn arbennig o bwysig ar gyfer rhagweld risgiau gwenwyndra dynol. Ar gyfer ADCs a fwriedir ar gyfer arwyddion tiwmor cam hwyr, nid oes angen astudiaethau adweithedd croes meinwe os nad oes unrhyw bryderon arbennig ar ôl gwerthuso effeithiau gwenwynig mewn rhywogaethau anifeiliaid perthnasol.
Ar hyn o bryd, mae ICH, FDA, NMPA, ac asiantaethau eraill wedi cyhoeddi canllawiau technegol perthnasol ar gyfer ymchwil ffarmacoleg a thocsicoleg anghlinigol i ADCs. Gall ymchwilwyr ddylunio astudiaethau ffarmacoleg a thocsicoleg glinigol nad ydynt yn rhesymol resymol yn seiliedig ar nodweddion y cyffuriau, gan wneud y mwyaf o allosod effeithiau ffarmacodynamig ac adweithiau gwenwyndra nad ydynt ar lefel anifeiliaid clinigol i bobl, gan ragweld effeithiolrwydd a diogelwch ADCs mewn cymwysiadau clinigol, a thrwy hynny wella cyfradd llwyddiant treialon clinigol. Gall datblygwyr cyffuriau gyfathrebu ag asiantaethau rheoleiddio yn seiliedig ar ganlyniadau ymchwil rhagarweiniol a materion sy'n bodoli eisoes i gael gwybodaeth cymorth ymchwil anghlinigol sydd wedi'i safoni'n wyddonol.
