Dadansoddiad biolegol o therapi genynnau yw gwerthusiad gwyddonol o gynhyrchion therapi genynnau o ran ffarmacocineteg, ffarmacodynameg, imiwnogenigrwydd, diogelwch, ac agweddau eraill in vivo. Mae cynhyrchion therapi genynnau yn fath newydd o gyffuriau sy'n defnyddio genynnau alldarddol neu dechnegau golygu genynnau i drin clefydau genetig neu gaffaeledig, gyda nodweddion penodoldeb uchel, hyd hir, ac effeithiolrwydd posibl. Ar hyn o bryd, mae cynhyrchion therapi genynnol yn bennaf yn cynnwys DNA noeth, RNA, trosglwyddo genynnau wedi'i gyfryngu gan fector, a golygu genynnau.
Trosglwyddiad genynnau wedi'i gyfryngu gan fector yw'r defnydd o fectorau firaol neu an-feirysol i ddosbarthu'r genyn targed i'r celloedd targed, gan ei wneud yn fynegiant neu'n integreiddio i'r genom gwesteiwr yn y celloedd. Trosglwyddiad genynnau wedi'i gyfryngu gan fector yw'r dull therapi genynnol a ddefnyddir amlaf, ac un o'r dulliau mwyaf addawol ar gyfer cymwysiadau clinigol. Yn eu plith, mae fector adeno firws cysylltiedig (AAV) yn firws DNA diffygiol sengl nad yw wedi'i amgáu, gyda manteision diogelwch uchel, imiwnogenedd isel, ystod gwesteiwr eang, a mynegiant sefydlog. Mae'n cael ei ystyried yn un o'r fectorau therapi genynnau mwyaf delfrydol.
Mae angen llunio'r strategaeth bio-ddadansoddol ar gyfer cyffuriau therapi genynnol AAV yn unol â'i fecanwaith cyffuriau arbennig a'i nodweddion cyffuriau. Yn gyffredinol, mae angen ystyried yr agweddau canlynol:
- Amlygiad i gyffuriau: Crynodiad neu gopi rhif y fector AAV a genyn targed mewn gwaed neu samplau biolegol eraill, gan adlewyrchu dosbarthiad a chlirio'r cyffur in vivo. Fel arfer defnyddir dull PCR meintiol amser real (qPCR) i ganfod.
- Bioddosbarthu: Dosbarthiad fector AAV a genyn targed mewn gwahanol feinweoedd ac organau, gan adlewyrchu targedu a phenodoldeb meinwe'r cyffur in vivo. Fel arfer defnyddir dull qPCR neu hybridization in situ (ISH) ar gyfer canfod.
- Dyfalbarhad a chlirio: Amser goroesi a llwybr dileu fector AAV a genyn targed in vivo, gan adlewyrchu sefydlogrwydd a metaboledd y cyffur in vivo. Fel arfer defnyddir dull qPCR neu ISH ar gyfer canfod.
- Gwaredu firaol: Y posibilrwydd o fector AAV yn cael ei ysgarthu neu ei secretu allan o'r corff trwy garthion neu secretiadau, gan adlewyrchu risg bosibl y cyffur i'r amgylchedd ac eraill. Fel arfer defnyddir qPCR neu ddull assay heintus ar gyfer canfod.
- Imiwnogenigrwydd: Y posibilrwydd o fector AAV a genyn targed yn achosi ymateb imiwn yn y corff, gan adlewyrchu effaith y cyffur ar system imiwnedd y corff. Fel arfer defnyddir dull ELISA neu electrochemiluminescence (ECL) i ganfod gwrthgorff gwrth-AAV neu wrth-gwrthgorff protein targed, a defnyddir ELISPOT neu ddull cytometreg llif i ganfod ymateb imiwn cellog.
- Gwenwyndra imiwnedd: Y posibilrwydd y bydd fector AAV a genyn targed yn achosi adweithiau niweidiol yn y corff sy'n gysylltiedig ag imiwn, gan adlewyrchu effaith y cyffur ar ddiogelwch y corff. Fel arfer defnyddir dull Bio-Plex neu ECL i ganfod cytocinau neu ffactorau llidiol, a defnyddir dulliau hematolegol neu fiocemegol i ganfod gweithrediad gwaed neu iau.
